வைரஸ் அல்லாத மரபணு சிகிச்சை நாள்பட்ட குறைந்த முதுகுவலிக்கு நம்பிக்கை அளிக்கிறது

சமீபத்திய ஆய்வில் பயோமெட்டீரியல்ஸ் இதழில் வெளியிடப்பட்டது, டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணி ஃபோர்க்ஹெட்டை வழங்குவதன் மூலம் டிஸ்கோஜெனிக் முதுகுவலிக்கு (DBP) சிகிச்சையளிப்பதற்கு வைரஸ் அல்லாத மரபணு சிகிச்சையை ஆராய்ச்சியாளர்கள் உருவாக்கியுள்ளனர். விவோவில் டிஜெனரேடிவ் இன்டர்வெர்டெபிரல் டிஸ்க்குகளாக (IVDகள்) பொறிக்கப்பட்ட எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் வெசிகல்ஸ் (eEVs) ஐப் பயன்படுத்தி பெட்டி F1 (FOXF1).

நாள்பட்ட குறைந்த முதுகுவலி (LBP) என்பது வயதான மக்கள்தொகை மற்றும் மோசமான ஓபியாய்டு பிரச்சனைகள் காரணமாக வளர்ந்து வரும் உலகளாவிய பிரச்சனையாகும். தற்போதைய சிகிச்சைகளில் குறுகிய கால நிவாரணம் அல்லது விலையுயர்ந்த அறுவை சிகிச்சைகள் அடங்கும், அடிமையாக்காத மற்றும் குறைவான ஆக்கிரமிப்பு சிகிச்சைகளின் அவசியத்தை எடுத்துக்காட்டுகிறது.

வளர்ச்சி காரணி நிர்வாகம், செல் சிகிச்சை மற்றும் வைரஸ் மரபணு சிகிச்சைகள் உள்ளிட்ட தற்போதைய உயிரியல் சிகிச்சைகள் விலங்கு மற்றும் மனித மாதிரிகளில் சிதைவைக் குறைக்கலாம். இருப்பினும், குறுகிய கால விளைவுகள், மோசமான நீண்ட கால செயல்திறன் மற்றும் தேவையற்ற நோயெதிர்ப்புத் திறன் மற்றும் டூமோரிஜெனிசிட்டி போன்ற கவலைகள் இந்த முறைகளை நேரடியாகப் பயன்படுத்துவதைத் தடுக்கலாம்.

இந்த ஆய்வில், ஆராய்ச்சியாளர்கள் FOXF1-eEV ஐப் பயன்படுத்தி இன்டர்வெர்டெபிரல் டிஸ்க் டிஜெனரேஷனுக்கான (IVD) வைரஸ் அல்லாத மரபணு சிகிச்சையை நிறுவினர்.

ஆராய்ச்சியாளர்கள் FOXF1 அல்லது pCMV6 ஐக் கொண்ட பிளாஸ்மிட்டுடன் முதன்மை மவுஸ் எம்ப்ரியோனிக் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்களை (PMEFs) ஒரு கட்டுப்பாட்டாக மாற்றினர் மற்றும் நானோ துகள்கள் கண்காணிப்பு மதிப்பீட்டை (NTA) பயன்படுத்தி eEV மாதிரிகளை வகைப்படுத்தினர்.

அவர்கள் அளவுள்ள தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன்-பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (qRT-PCR) மற்றும் வழக்கமான PCR ஐப் பயன்படுத்தி eEV களில் மூலக்கூறு சரக்குகளை திறமையாக ஏற்றுவதை மதிப்பீடு செய்தனர். வெஸ்டர்ன் பிளட் பகுப்பாய்வு FOXF1 மற்றும் eEV வடிவங்களில் குறிப்பிட்ட EV புரதங்களை அடையாளம் கண்டுள்ளது. குழுவானது நன்கொடை செல்கள் மற்றும் உருவாக்கப்பட்ட eEVகளில் FOXF1 பிளாஸ்மிட் டிஎன்ஏ இருப்பதைக் கண்டறிய அப்ஸ்ட்ரீம் மற்றும் கீழ்நிலை பாலிலிங்கர் பகுதிகளை மேம்படுத்தும் பிளாஸ்மிட்களைப் பயன்படுத்தியது.

அவர்கள் eEVகள் மற்றும் நன்கொடை செல்களில் உள்ள பிளாஸ்மிட் டிஎன்ஏவில் இருந்து தயாரிக்கப்பட்ட முழு நீள எம்ஆர்என்ஏவை ஆய்வு செய்தனர்.

டிபிபியின் விலங்கு மாதிரியில் திசு செயல்பாட்டை மீட்டெடுக்கவும் வலி பதில்களை மாற்றவும் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணிகளுடன் எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் வெசிகல்களை ஆராய்ச்சியாளர்கள் உருவாக்கினர்.

இன்டர்வெர்டெபிரல் டிஸ்க் சிதைவின் FOXF1 eEV தடுப்பை தீர்மானிக்க டிஸ்கோஜெனிக் முதுகுவலியின் மவுஸ் மாதிரியில் சேதமடைந்த இன்டர்வெர்டெபிரல் டிஸ்க்குகளுக்கு FOXF1 ஐ எடுத்துச் செல்லவும் விநியோகிக்கவும் EVகளை அடையாளம் கண்டனர்.

மவுஸ் இன்டர்வெர்டெபிரல் டிஸ்க்குகளின் பயோமெக்கானிக்கல் சோதனையை இமேஜிங், எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் மேட்ரிக்ஸ் (ஈசிஎம்) மாற்றங்கள் மற்றும் 12 வாரங்களுக்குப் பிறகு வலி மறுமொழிகள் ஆகியவை அமைப்பு மற்றும் செயல்பாட்டில் ஏற்படும் மாற்றங்களை உறுதிப்படுத்தவும், அத்துடன் சிகிச்சை தலையீட்டால் தூண்டப்பட்ட வலியை உறுதிப்படுத்தவும் குழு ஒன்றிணைத்தது.

சிகிச்சைக்கு முந்தைய மற்றும் சிகிச்சைக்கு முந்தைய வலி மதிப்பீடுகளில் மைக்ரோ-கம்ப்யூட்டட் டோமோகிராபி (மைக்ரோ-சிடி), காந்த அதிர்வு இமேஜிங் (எம்ஆர்ஐ), மெக்கானிக்கல் சோதனைகள், அல்சியன் ப்ளூ (ஏபி) மற்றும் பிக்ரோசிரியஸ் ரெட் (பிஎஸ்ஆர்) ஸ்டைனிங், டைமெதில்மெத்திலீன் ப்ளூ சோதனை மற்றும் இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி (IHC) ஆகியவை அடங்கும். )).

ஆய்வு அறுவை சிகிச்சை நுட்பத்தை உள்ளடக்கியது, இதில் அறுவைசிகிச்சைக்குப் பிந்தைய வலியைக் கட்டுப்படுத்த ஆராய்ச்சியாளர்கள் எலிகளுக்கு தோலடியாக புப்ரெனார்ஃபின் ஈஆர் செலுத்தினர்.

அறுவை சிகிச்சைக்கு முன் மற்றும் அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு நான்கு முதல் பன்னிரண்டு வாரங்களுக்கு ஒருமுறை, திறந்தவெளி சோதனை, குளிர் தட்டு, வால் சஸ்பென்ஷன் மற்றும் கம்பி சஸ்பென்ஷன் போன்ற பல்வேறு நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி, குழு நடத்தை மதிப்பீடுகளை நடத்தியது.

திறந்த களச் சோதனையானது எலிகளின் தன்னிச்சையான செயல்பாட்டை மதிப்பீடு செய்தது; குளிர் தகடு சோதனைகள் வெப்ப ஹைபரால்ஜியா அளவிடப்படுகிறது; வால் சஸ்பென்ஷன் சோதனைகள் அச்சு வலியை அளவிடுகின்றன; மற்றும் கம்பி சஸ்பென்ஷன் சோதனைகள் வலிமையை அளவிடுகின்றன.

அறுவைசிகிச்சைக்குப் பன்னிரண்டு வாரங்களுக்குப் பிறகு, குழு விலங்குகளின் இடுப்பு முதுகுத்தண்டுகளைப் பிரித்தது, தொடை நரம்பு மற்றும் தமனி தடயங்களைப் பயன்படுத்தி L4 மற்றும் L5, L5 மற்றும் L6, மற்றும் L6 மற்றும் S1 IVD ஆகியவற்றுக்கு இடையே உள்ள இன்டர்வெர்டெபிரல் டிஸ்க்குகளை அடையாளம் கண்டது. ஹிஸ்டாலஜியை மதிப்பிடவும் கிளைகோசமினோகிளைக்கான் (GAG) உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிக்கவும் L5/L6 IVD ஐப் பயன்படுத்தினர்.

FOXF1 eEVகள், வட்டு உயரம், திசு நீரேற்றம், புரோட்டியோகிளைக்கான் உள்ளடக்கம் மற்றும் இயந்திர பண்புகளில் மேம்பாடுகள் உட்பட, IVD கட்டமைப்பு மற்றும் செயல்பாட்டை மீட்டெடுக்கும் போது வலி பதில்களைக் கணிசமாகக் குறைத்தது.

FOXF1 டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணி மூலம் மாற்றப்பட்ட முதன்மை ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்களில் இருந்து FOXF1-ஏற்றப்பட்ட eEVகளை வெளியிடுவதில் இந்த ஆய்வு கவனம் செலுத்தியது. அளவு RT PCR ஆனது FOXF1 mRNA டிரான்ஸ்கிரிப்ட் அளவுகள் மற்றும் pCMV6 உடன் மாற்றப்பட்ட கலங்களுடன் ஒப்பிடும்போது முழு நீள டிரான்ஸ்கிரிப்ட் செய்யப்பட்ட FOXF1 mRNA அளவுகளில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பைக் காட்டியது.

FOXF1 eEV சிகிச்சையானது 12 வாரங்கள் வரை லும்பார் டிஸ்க் பஞ்சர் மவுஸ் மாதிரியில் வலியை குறைக்கும். பெண் எலிகள் FOXF1-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட குழுவில் காயம் அடைந்த குழுவை விட நீண்ட கையகப்படுத்தல் நேரத்தைக் காட்டின, இது சிகிச்சைக்குப் பிறகு குறைந்தது 12 வாரங்களுக்கு நீடித்தது.

FOXF1 eEV சிகிச்சையானது நீரேற்றம் மற்றும் T2 எடையுள்ள IVD படத் தீவிரத்தை பராமரிக்கும் போது விவோவில் காயமடைந்த மற்றும் சிதைந்த விலங்குகளில் நீரேற்றம் மற்றும் IVD திசுக்களின் உயரத்தை மேம்படுத்தியது.

இருப்பினும், காயமடைந்த விலங்குகள் மற்றும் pCMV6 eEV உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட விலங்குகளில் வட்டு உயரம் குறைவதை குழு கவனித்தது. FOXF1 eEV உடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட எலிகள் சிகிச்சைக்கு 12 வாரங்களுக்குப் பிறகு வட்டு உயரத்தில் எந்தக் குறைவும் இல்லை. பாலினம் செயல்பாட்டு முடிவுகளை பாதிக்கவில்லை.

FOXF1 eEVகள் விவோவில் சேதமடைந்த மற்றும் சிதைந்த IVDகளின் இயந்திர செயல்பாட்டை மீட்டெடுத்தன. அச்சு அழுத்தத்தின் கீழ், சேதமடைந்த IVDகளுடன் ஒப்பிடும்போது FOXF1 eEV-சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட IVDகள் அதிக இயல்பான NZ விறைப்பைக் காட்டின.

க்ரீப் நிலைமைகளின் கீழ், சேதமடைந்த IVDகள் அதிகரித்த இயல்பான க்ரீப் இடப்பெயர்வுகளை வெளிப்படுத்தின, இது இயல்பாக்கப்பட்ட க்ரீப் எலாஸ்டிக் விறைப்புத்தன்மை குறைவதைக் குறிக்கிறது.

சேதமடைந்த IVD களில் GAG உள்ளடக்கத்தை குறைப்பது இயந்திர நெகிழ்வுத்தன்மையை அதிகரிக்கிறது என்று முடிவுகள் காட்டுகின்றன, ஆனால் eEV சிகிச்சையானது கிளைகோசமினோகிளைக்கான் இழப்பையும் இயந்திர செயல்பாட்டில் அடுத்தடுத்த மாற்றங்களையும் தடுக்கிறது.

FOXF1 eEVகள் புரோட்டியோகிளைகான்கள் மற்றும் GAGகளின் அளவை அதிகரிப்பதன் மூலம் IVD இல் கட்டமைப்பு மற்றும் செயல்பாட்டு மாற்றங்களை ஏற்படுத்தியது.

இந்த டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணிகளை சிதைவுற்ற மற்றும் வலிமிகுந்த IVD மூட்டுகளுக்கு வழங்குவதன் மூலம் டிபிபி போன்ற வலிமிகுந்த மூட்டு நோய்களுக்கு eEVகள் சிகிச்சை அளிக்கும் என்று ஆய்வு முடிவுகள் காட்டுகின்றன.

இந்த மூலோபாயம் நோயினால் ஏற்படும் கட்டமைப்பு மற்றும் செயல்பாட்டு அசாதாரணங்களைக் குறைக்கவும், பாலினம் சார்ந்த வலி பதில்களைக் கட்டுப்படுத்தவும் உதவும்.

விவோவில் சிதைந்த NP செல்களை ஒரு அனபோலிக் நிலையாக மாற்ற FOXF1 போன்ற வளர்ச்சிப் படியெடுத்தல் காரணிகளைப் பயன்படுத்தவும் ஆராய்ச்சியாளர்கள் பரிந்துரைத்துள்ளனர். அதன் சிகிச்சை செயல்திறனைக் கண்டறிய மேலும் ஆராய்ச்சி தேவை.